PDF《地塞米松脂肪乳滴眼液载药性能的评价 *》

1 HPLC chromatograms of reference substance (A) , eye drop sample (B) and blank control (C) 2.3.2 线性关系考察 精密量取质量浓度为

5、

10、

30、

50、

100 和200μg・mL-1 的系列对照品溶液进样, 以质量浓度 (C)对峰面积 (A)作线性回归, 得标准 曲线方程: A=44 528C-5 971.5 r=0.999

9 结果表明地塞米松质量浓度在 5~200 μg・mL-1 范围内, 与峰面积呈良好线性关系. 2.3.3 仪器精密度试验 取质量浓度为

5、

30、

100 μg・mL-1 的对照品溶液, 分别于

0、

4、

8、

12、

24 h 进 样测定, 计算日内精密度;

连续

5 d 每天进样

1 次, 计 算日间精密度.低、 中、 高浓度的日内精密度和日间 精密度 (RSD) 均小于 2%, 符合测定要求. 2.3.4 回收率试验 分别精密移取质量浓度为

80、

100、 120μg・mL-1 的对照品溶液

5 mL 置于

10 mL 量 瓶中, 加入空白滴眼液 0.5 mL, 破乳并用流动相定容 至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液按 2.2.1 项下色谱条 件进样测定加样回收率.低、 中、 高3个浓度的加样 回收率 (n=3) 分别为 96.9%、 102.0% 和103.9%, RSD 分别为 1.1%、 0.57% 和1.1%. 2.3.5 重复性试验 精密称取同一批地塞米松滴 眼液样品(2015031473) , 平行制备供试品溶液6份, 测得样品中地塞米松平均含量为 (0.98±0.14) mg・mL-1 , RSD 为1.4%. 2.4 滴眼液中地塞米松在各相的分布 取滴眼液

20 mL, 采用低温超高速离心法离心

1 h (温度

8 ℃、 转速

30 000 r・min-1 ) , 吸取离心管下 层水溶液同条件继续离心

3 h, 取下层澄清液, 流动 相定容, 经HPLC 测定即为水相游离药物量;

合并

2 次上层乳状液, 同条件继续离心

2 h 后, 取离心液上 层油状物, 按 2.2.3 项下方法制备供试品溶液, 采用HPLC 测定即为油相中分布的量, 其中油水界面 层的药物按油水界面层药物量 = *100% 计算 (其中 M总 为药物在乳剂中总量, M水为水相中的药物量, M油为油相中药物量) , 滴眼液中地塞米松在各相中的分布情况为: 水相(42.43±4.27) %, 油相(31.12±3.20) %, 油水界面(24.45±1.89) %. 2.5 滴眼液中药物包封率的测定 2.5.1 游离药物洗脱回收试验 采用凝胶微柱 (0.8 cm*3 cm) 离心法[14] (2

500 r・min-1 ) 测定

50、

100、

300 μg・mL-1 的对照品溶液的洗脱回收率, 分别精 密移取 0.2 mL 上柱, 分别以水、 50% 乙醇在离心力

2 500 r・min-1 下洗脱

2 min, 收集洗脱液, 共接取

15 管, 每管 0.2 mL, 经HPLC 测定 4~14 管为游离药物, 收集游离药物部分以流动相稀释至

20 mL, 按 2.2.1 ・735・ 项下色谱条件进样测定地塞米松的量, 求得低、 中、 高3个浓度的平均回收率 (n=3) 分别为 96.3%、 97.8%、 101.4%, RSD 分别为 1.5%、 1.1% 和1.8%. 2.5.2 滴眼液洗脱回收试验 取上述

3 种浓度的地 塞米松对照品溶液, 分别加入等体积的空白滴眼液, 混合均匀后精密移取 0.2 mL 上柱, 相同条件进行柱 分离, 收集 4~14 管的游离药物, 测定地塞米松的量, 求得平均加样回收率 (n=3)分别为 95.8%、 98.2%、 103.5%, RSD 分别为 0.9%、 1.3%、 1.8%. 2.5.3 包封率的测定采用凝胶微柱(0.8 cm*

3 cm) 离心法 (2

500 r・min-1 ) 分离地塞米松滴眼液, 高效液相色谱法测定游离药物的含量.精密量取地 塞米松滴眼液 0.2 mL,

2 500 r・min-1 离心

2 min, 收 集滤液;

加入 0.2 mL 蒸馏水于凝胶柱顶端, 同法连续 洗脱