编辑: star薰衣草 2013-02-08

八、说明与注意事项 . 碱性酒石酸铜http://www.51wendang.com/doc/ee36f9ceaa4c2bd89bac0edf甲液、乙液应分别配制贮存,用时才混合. . 碱性酒石酸铜的氧化能力较强,可将醛糖和酮糖都氧化,测得的是总还原糖量. 3. 本法对糖进行定量的基础是碱性酒石酸铜溶液中Cu 的量,所以,样品处理时 不能采用硫酸铜――氢氧化钠作为澄清剂,以免样液中误入Cu2 得出错误的结果. . 在碱性酒石酸铜乙液中加入亚铁氰化钾,是为了使所生成的Cu2 O对的红色沉淀 与之形成可溶性的无色络合物,使终点便于观察. . 次甲基蓝也是一种氧化剂,但在测定条件下其氧化能力比Cu2 弱,故还原糖先与

2 Cu反应,待Cu完全反应后,稍过量的还原糖才会与次甲基蓝发生反应,溶液蓝色消失, 指示到达终点. . 整个滴定过程必须在沸腾条件下进行,其目的是为了加快反应速度和防止空气 进入,避免氧化亚铜和还原型的次甲基蓝被空气氧化从而使得耗糖量增加. . 预测定与正式测定的检测条件应一致.平行实验中消耗样液量应不超过0.1mL. . 测定中还原糖液浓度、滴定速度、热源强度及煮沸时间等都对测定精密度有很 大的影响.还原糖液浓度要求在0.l%左右,与标准葡萄糖溶液的浓度相近;

继续滴定 至终点的体积数应控制在0.5~1mL以内,以保证在1min内完成续滴定的工作;

热源一 般采用800W电炉,热源强度和煮沸时间应严格按照操作中规定的执行,否则,加热至 煮沸时间不同,蒸发量不同,反应液的碱度也不同,从而影响反应的速度、反应进行的 程度及最终测定的结果. 实验七 蛋白质的测定(常量凯氏定氮法)

一、原理 新鲜食品中的含氮化合物大多以蛋白质为主体,所以检验食品中蛋白质时,往往测 定总氮量,然后乘以蛋白质换算系数,即可得到蛋白质含量.凯氏定氮法可用于所有动 物性、植物性食品的蛋白质含量测定,但因样品中常含有核酸、生物碱、含氮类脂、卟 啉以及含氮色素等非蛋白质的含氮化合物,故通常将测http://www.51wendang.com/doc/ee36f9ceaa4c2bd89bac0edf定结果称为粗蛋白质. 凯氏定氮法由Kieldahl于18

3 3年首先提出,经长期改进,迄今已演变成常量法、微 量法、改良凯氏定氮法、自动定氮仪法、半微量法等多种方法.将样品与浓硫酸和催化 剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的 有机氮转化为氨,并与硫酸结合成硫酸铵,此过程称为消化.加碱将消化液碱化,使氨 游离出来,再通过水蒸气蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收形成硼酸铵再以标准盐酸或硫酸 溶液滴定,根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量. . 消化:消化反应方程式如下: NH2(CH2)2COOH 3H2SO4→ (NH4) 2SO4 6CO2 12SO2 16H2O 浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水并炭化为碳、氢、氮. 浓硫酸又有氧化性,使炭化后的碳氧化为二氧化碳,硫酸则被还原成二氧化硫: 2H2SO4 C 2SO2 2H2O CO2 二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随之与硫酸作用生成硫酸铵 留在酸性溶液中: SO4 2NH3 = (NH4) 2SO4 在消化反应中,为........

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