PDF《ᖂᇘ⌕催य़ഛ䋼ᴎࠊ໛替莫唑胺白蛋白纳米粒》

1 仪器与试药 ・ ・ 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2013, 44(1)

42 微射流高压均质机(上海惠翼代理www.huiyi-fluid.com)型台式冻干机 ( 美国 Labconco 公司 ) ;

PSS型激光粒度测定仪(上海惠翼代理www.huiyi-fluid.co) 透析袋 ( 上海绿鸟科技发展有限公司,截留分子量

8 000 ~

14 0000) ;

微透析脑立体定位架及实验装置系统和微透析脑探针

1 原药 ( 武汉富驰生物科技有限公司,含量 >

99%,批号110415) ;

BSA( 北京索莱宝科技有限公司,含量 >

98%, 批号 109K1542) ;

中碳链三甘酯 (GTCC,北京凤礼精求商 贸有限责任公司,批号 20100423) ;

人工脑脊液 /mg・ml-1 : NaCl 8.059,NaHCO3 0.084,KCl 0.373,CaCl2・2H2O 0.147,MgCl2・6H2O 0.203,NaH2PO4 0.138,pH 7.4 ;

复方 氯化钠溶液 ( 杭州民生药业有限公司,规格

500 ml,批号 31107291) ;

甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯. 清洁级 SD 大鼠 [(250±10)g, 雄性, 本校实验动物中心, 合格证号 SCXK( 沪)2007-0005].所有动物试验均按照本 校动物饲养和使用指南进行.

2 方法与结果 2.1

1 白蛋白纳米粒的制备 称取 BSA 2.5 g 溶于水

50 ml 中,加0.05 mol/L 枸橼酸调至 pH 5.4,构成水相,并加入过量

1 溶 解至饱和 ;

另取

1 原药

150 mg、二氯化碳

2 ml 和GTCC

200 mg 混合后构成油相.将水相快速加至油 相中,搅匀后制得初乳.置高压均质机中,750 psi 压力下循环

10 次.减压蒸除溶剂,冻干即得

1 白 蛋白纳米粒. 2.2 形态与粒径

1 白蛋白纳米粒冻干品外观为疏松的粉末状, 用生理盐水复溶后,将其滴于铜网上,静置

10 min 后用滤纸片吸干,再滴加 2%磷钨酸溶液负染

2 min,自然挥干,透射电镜下观察纳米粒形态,结 果显示

1 白蛋白纳米粒形态圆整, 大小均匀, 见图 1. 室温条件下,用PSS激光粒度测仪(上海惠翼 代理www.huiyi-fluid.com)测得

3 批1白蛋白纳米粒的平均粒径为 (117.60±3.40)nm, 为(0.08±0.01),? 电位为 (-14.70±3.51)mV. 2.3 包封率与载药量的测定 2.3.1 分析方法的建立 色谱柱 Agilent Extend C18 柱(4.6 mm*250 mm,

5 ?m) ;

流动相 0.5%乙酸 - 甲醇 (85 ∶ 15) ;

流速 1.0 ml/min ;

柱温

25 ℃ ;

检测波长

329 nm ;

进样量

20 ?l. 标准曲线 : 精密称取减压干燥至恒重的

1 10 mg, 置100 ml 量瓶中,用0.5%乙酸溶解并定容,得100 ?g/ml 的1标准贮备液,再用 0.5%乙酸稀释成

2、

5、

10、

20、50 和70 ?g/ml 系列浓度的标准溶液. 按 2.3.1 项下色谱条件测定, 以峰面积 A 为纵坐标,

1 浓度 c 为横坐标进行线性回归,得标准曲线方程 为A=61.091 5c-5.375 4,r=0.999 9,表明药物浓度 在2~100 ?g/ml 范围内与峰面积线性关系良好. 2.3.2 包封率与载药量 精密量取

1 白蛋白纳米粒混悬液

2 ml,置已处 理的透析袋内,放入 0.5%乙酸

100 ml 中,在室温 下透析

1 h 后取透析液进样测定,由标准曲线方程 计算游离药物量.同时用新鲜等量释放介质替换原 释放介质,同法每隔

2 h 计算一次游离药物的量. 结果透析

7 h 后透析液中药物浓度达到最大值,表 明游离药物已基本释放完全,此时计算得到纳米粒 中全部游离药物的量,记作 W1.另精密量取

1 白 蛋白纳米粒混悬液 0.5 ml, 经胃蛋白酶反应, 用0.5% 乙酸定容至

100 ml,测得纳米粒中的总药物量,并 折算成纳米粒混悬液

2 ml 中总药物量,记作 W0. 将1白蛋白纳米粒混悬液