PDF《958年创刊 2》

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5 8年创刊

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1 6年10月( 上) ( 半月刊・总第

5 1 1期) (

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1 0出版) 总编:张禹副主编:朱海虹 副社长:李延杰 编辑室主任:孙晶编辑室副主任:张颖责任编辑:邰丽萍 栏目编辑:朱海虹 孙晶邰丽萍 王俊伟 孙迪美术编辑:王洁编务:彭勃刊网部主任:王兴波 记者:纪成网编:李延杰 出版单位:《 黑龙江畜牧兽医》 杂志社 地址:哈尔滨市香坊区哈平路

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7 ( 黑龙江畜牧兽医杂志社) 国内统一连续出版物号: C N2 3-

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3 4 印刷单位:哈尔滨工业大学印刷厂 总发行处:哈尔滨市邮政局( 邮发代号

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1 1 ) 数字出版单位: 《 中国学术期刊( 光盘版) 》 电子杂志社有限公司 数字出版网站: 中国知网( w w w . c n k i . n e t ) 广告经营许可证:

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4 近端增 强子主要负责调控外胚层中Oct4的 表达[

6 ,

9 ] .O c t 4是迄今人们发现最早也是最重要的维 持胚胎干细胞多潜能性和自我更新的关键基因[

1 0 ] . 在以往的研究中, 人和小鼠的 O c t 4基因启动子的研 究已有报道, 但绵羊的相关研究还很少.本研究构建 由Oct4启动子驱动并携带有报告基因的真核表达载 体, 通过转染成纤维细胞、 胚胎干细胞和早期胚胎检 测启动子表达活性, 以期为绵羊 O c t 4基因表达调控 和绵羊 i P S 诱导提供研究依据.

1 材料与方法

1 .

1 试验动物、 细胞及菌株 性成熟的 I C R小鼠, 购自吉林大学实验动物中 心;

T r a n s

5 α感受态细胞, 购自全式金( T r a n s G e n ) 公司;

小鼠 E S细胞, 为东北林业大学生命科学学院动 物发育研究室自存.

1 .

2 主要试剂、 药品及载体 D N AM a r k e r Ⅲ、 限制性内切酶( B a m HⅠ、 N d e Ⅰ、 B g l Ⅱ) 及T4D N A连接酶, 购自宝生物工程( 大连) 有限公司( T a K a R a ) ;

质粒小提试剂盒, 购自北京百泰 克生物技术有限公司;

胶回收试剂盒和无内毒素质粒 提取试剂盒, 购自 O M E G A公司;

胎牛血清( F B S ) , 购自Gibco公司;

D M S O 、 丙酮酸钠、 β- M E和BSA及其 他试剂, 购自 S i g m a -A l d r i c h公司;

脂质体转染试剂 盒( L i p o f e c t T r a n s f e c t i o n ) , 购自天根生化有限科技公 司;