PDF《富硒金针菇栽培及成分分析研究》

0 引言 金针菇(Flammulina velutipes)又名朴菇、 冬菇, 是 一种秋、 冬初栽培的食用菌[1] , 其肉质细、 味鲜、 营养丰 富, 食用价值高, 并能防治多种疾病, 还具有提高儿童 体质和智力的作用.

富含蛋白质、 碳水化合物、 矿质元 素、 维生素和粗纤维, 含脂肪较低, 是一种不可多得的 高营养食品. 金针菇含有各种人体必需的氨基酸, 是最早进行 人工栽培的食用菌之一.在国际市场上已经发展为仅 次于蘑菇、 香菇而列第

3 位的食用菌.金针菇菌盖小 而粘滑, 菌形如铜线, 色泽金黄间白, 菌柄细长脆嫩, 形美, 味鲜, 因其具有多种药效作用而被广泛用于药膳, 是世界上著名的食药两用菌和观赏菌.随着人们对均 衡营养的追求和科学研究的深入, 金针菇已经成为营 养学家们的新宠. 硒是人体必需的微量元素之一, 是多种酶的激活 剂, 具有保护胸腺、 维持淋巴细胞活性和促进抗体产生 的作用, 可提高人体免疫机能, 对重金属汞和砷具有解 毒作用.富硒金针菇具有清除自由基、 消炎、 抗肿瘤、 抗衰老和抗脂质过氧化的作用. 笔者对富硒金针菇子实体中硒糖、 硒含量和氨基 酸进行测定分析, 为富硒金针菇的开发利用提供理论 依据.

1 材料与方法 1.1 试验时间、 地点 研究田间试验于

2013 年在安徽鑫农食用菌有限 基金项目: 安徽省创新训练项目 巴西菇富硒栽培、 含量检测和氨基酸分析 (AH201310357174). 第一作者简介: 何炎, 女, 1985年出生, 安徽六安人, 助教, 硕士, 主要从事生态学研究.通信地址:

230031 安徽省合肥市蜀山区史河路8号 安徽大 学江淮学院, Tel: 0551-65122457, E-mail: 181563733@qq.com. 通讯作者: 李能树, 男, 1956年出生, 安徽六安人, 高级实验师, 本科, 从事食用真菌学研究.通信地址:

230601 安徽省合肥市九龙路111号 安徽大学 生命科学学院, Tel: 0551-63861585, E-mail: Shnl209@163.com. 收稿日期: 2014-04-23, 修回日期: 2014-07-22. 富硒金针菇栽培及成分分析研究 何炎1 , 李能树2 (1 安徽大学江淮学院, 合肥 230039;

2 安徽大学生命科学学院, 合肥 230603) 摘要: 为研究富硒金针菇对人体健康的影响, 采用富硒栽培、 全自动氨基酸分析仪、 苯酚-硫酸法对金针 菇子实体总糖、 氨基酸的种类和含量进行测定研究.结果表明: 金针菇子实体均含有总糖、 总氨基酸和 游离氨基酸17种, 其中人体必需氨基酸7种.确定硒糖的最佳浸提温度80℃、 浸提时间3 h、 提取3次合 并滤液;

总糖菌盖、 菌柄含量分别为40.31%、 48.99%, 硒含量为34.2355 μg/g. 关键词: 富硒;

金针菇;

子实体;

氨基酸 中图分类号: S646.1+5 文献标志码: A 论文编号: 2014-0233 Selenium-rich Flammulina velutipes Cultivation and Composition Analysis for Study He Yanxin1 , Li Nengshu2 (1 School of Jianghuai, Anhui University, Hefei 230039, Anhui, China;

2 The School of Life, Anhui University, Hefei 230603, Anhui, China) Abstract: In order to study Se Flammulina velutipes on human health issues. Using selenium-rich cultivation, automatic amino acid analyzer, phenol-sulfuric acid method Flammulina velutipes total sugar, amino acids the type were content measured study. The results showed that: Flammulina velutipes fruiting bodies contained total sugar,

17 kinds of amino acids and free amino acids, including

7 kinds of essential amino acids. Determining the optimum leaching selenium sugar temperature 80℃, extraction time

3 h, extracted

3 times the combined filtrate;

total sugar pileus, stipe contents were 40.31%, 48.99%, selenium content of 34.2355 μg/g. Key words: Selenium-rich;

Flammulina velutipes;

Fruiting Body;

Amino Acid www.caaj.org 农学学报 2015,5(2):75-78 Journal of Agriculture 公司进行, 室内试验在安徽大学生命科学学院生物实 验教学中心进行. 1.2 试验材料与仪器 金针菇菌种 (安徽鑫农食用菌有限公司提供) ;

80 目分样筛、 葡萄糖、 亚硒酸钠、 苯酚、 浓硫酸、 浓盐酸 (国药、 分析纯) . 电子天平、 恒温干燥箱、 ZK-82A型真空干燥箱、 日立835-50型氨基酸自动分析仪. 1.3 试验步骤 1.3.1 富硒金针菇栽培 栽培料配方: 棉籽壳78%、 麦麸 20%、 石膏1%、 白糖1%, 搅拌均匀, pH自然;

准确称取 105℃烘干至恒重的亚硒酸钠2.19 g, 定容至1000 mL, 得溶液为1 g/L的标准液加入. 栽培管理按常规方法 进行. 1.3.2 硒含量测定 (1) 样品处理.将子实体在60℃烘箱中烘干至恒 重, 在干燥器中冷却, 然后用碾钵将样品粉碎, 过80目筛. (2) 硒含量测定.准确称取处理好的样品 0.02 g 于250 mL 三角瓶中, 加3:4(V/V)硫酸高氯酸消解液

6 mL, 在室温下放置, 至瓶中内容物为糊状时, 加入 1.5 mL钼酸钠溶液, 摇匀, 置于水浴锅上, 加热至激烈 反应后, 继续加热至逐渐变成淡黄色为止, 取下冷却, 加蒸馏水

18 mL, 加分析纯 NaOH 4.8 g, 然后滴加

8 mol/L NaOH 溶液至 pH 为中性, 加1mL 40%盐酸羟 胺溶液, 0.5 mL 0.2 mol/L EDTA溶液,

1 mL1:1(V/V) 磷 酸溶液, 摇匀, 加1mL 0.2%邻苯二胺溶液, 摇匀后静 置2h, 加5mL 甲苯, 摇动

1 min, 静置

10 min, 取上清 液于紫外波长335 nm处测其A值.处理样品的同时, 用空白做对照. 1.3.3 氨基酸含量测定 将上述不同的试验材料碾碎, 过80目筛, 准确称取分析样品100 mg (精确到0.0001 g) , 放入水解管.向管内加

6 mol/L 盐酸 15~20 mL, 抽真 空, 充2000 g/m2 的高纯度氮气, 如此重复3次, 在氮气 状态下将管口封住并置于 110℃水解

22 h 后取出冷 却.水解液过滤, 用去离子水冲洗, 再全部转移到100 mL 容量瓶, 定容, 吸取滤液1 mL放到10 mL小烧杯中, 在ZK-82A 型真空干燥箱内, 60℃、 0.08 MPa 下干燥, 用1mL 0.1 mol/L盐酸溶解上机检测. 1.3.4 游离氨基酸测定 称取样品 0.100 g, 投入试管 内, 用80%乙醇 (无水乙醇稀释而成) 置于 80℃水浴中 提取, 目的是蒸馏去酒精, 等样品呈现糊状, 加乙醚5 mL, 马上塞试管塞, 充分振荡.用50 mL 分液漏斗反复抽 提2次, 收集, 转到

50 mL 容量瓶中, 定容至刻度, 摇匀;

取5mL 提取液, 冷冻离心干燥, 加进 0.02 mol/L HCl

1 mL, 用日立 835-50A 型氨基酸自动分析仪测定 其含量. 1.3.5 总糖的提取 定量称取样品于水中浸泡24 h后, 80℃恒温水浴浸提3 h, 重复3次, 浓缩滤液加入95%乙醇, 静置、 离心、 去蛋白, 定容得金针菇水溶性多糖溶 液.水解后糖溶液冷却20 min (样品液呈棕色, 絮状) , 用大漏斗过滤, 过滤后的样品液呈棕色澄清溶液, 以蒸 馏水定容至

250 mL 备用, 采用苯酚-硫酸法测其糖含 量.

2 结果与分析 2.1 金针菇子实体硒含量 样品经消化和硒含量测定步骤后, 得到其335 nm 处的吸收值, 以硒含量为横坐标, 吸收值为纵坐标作 图.以335 nm处的吸收值A对含量C进行回归, 得到 回归方程为: A=0.0242C+0.0414, R2 =0.977.通过紫外 分光光度计测 A 值, 测得金针菇子实体硒含量结果为 34.2355 μg/g. 2.2 金针菇子实体氨基酸含量 从表1可以看出, 金针菇子实体含有17种氨基酸, 种类较齐全, 菌盖、 菌柄总氨基酸含量分别为 50.

4、 28.17 mg/g, 其中含有人体

7 种必需氨基酸, 占氨基酸 总量的56.45%.金针菇子实体菌盖、 菌柄游离氨基酸 含量分别为56.

12、 35.36 mg/g. 金针菇的菌柄与菌盖均含

17 种氨基酸、

7 种必需 氨基酸, 以及婴幼儿所需的组氨酸(His)和精氨酸(Arg)

2 种.它们含有人体必需氨基酸成分较全, 其中赖氨 酸(Lys)和精氨酸(Arg)含量尤其丰富, 对增强智力尤其 是对儿童的身高和智力发育有良好的作用, 人称 增智 菇 .中国人习惯以缺乏赖氨酸的稻米和小麦等谷物 为主食.金针菇富含的赖氨酸, 正好起互补赖氨酸的 氨基酸 苏氨酸Thr 亮氨酸Leu 异亮氨酸Ile 苯丙氨酸Phe 缬氨酸Val 甲硫氨酸Met 赖氨酸Lys 色氨酸Trp 精氨酸Arg 菌盖 4.05 2.53 3.76 7.02 3.69 2.79 2.49 2.31 3.98 菌柄 1.22 1.09 1.02 6.86 1.13 1.07 1.28 2.11 2.13 氨基酸 组氨酸His 丙氨酸Ala 天冬氨酸Asp 谷氨酸Glu 丝氨酸Ser 酪氨酸Tyr 甘氨酸Gly 脯氨酸Pro 菌盖 1.93 5.53 1.81 3.87 3.19 2.69 2.18 2.03 菌柄 1.57 2.09 0.19 2.63 2.22 1.65 1.13 0.85 表1 金针菇氨基酸游离氨基酸含量 何炎缘: 富硒金针菇栽培及成分分析研究 mg/g ・ ・76 作用. 在17种氨基酸中, 金针菇子实体的苯丙氨酸(Phe) 含量为13.88 mg/g, 在人体内苯丙氨酸经食物摄取后, 部分用于合成蛋白质, 它的激活为前奏, 没有苯丙氨 酸, 体内的蛋白质合成就无法进行;

其余部分经肝脏苯 丙氨酸羟化酶的作用转变为酪氨酸, 进而转化为其他 生理活性物质.大多数食品中, 苯丙氨酸的含量很少, 经常食用金针菇, 可以改进食物结构, 补充日常食物中 氨基酸的不足.谷氨酸(Glu)是构成鲜味的主要来源 之一, 它和天冬氨酸(Asp)影响味觉中鲜味的形成, 这 几种呈现甜、 鲜味的氨基酸同其他物质共同形成复杂 的味感含量相对较高, 这也是其味道鲜美的原因. 2.3 金针菇总糖的测定 吸取 2.0 mL 样品, 然后加入 6%苯酚 1.0 mL 及浓 硫酸5.0 mL, 摇匀冷却室温放置20 min以后于485 nm 测光密度.每次测定取双样对照.以标准曲线计算多 糖含量. 以葡萄糖质量浓度(x, μg/mL)为横坐标, 吸光度(y) 为纵坐标, 绘制吸光度, 葡萄糖........