PDF《键词核型 多角体》

6, 一第19卷 第1期1995年 3月中国病毒学VI ROLOG I CA SI NI CA | | t .

V0l Jl

0 No .1 M ar . 】

0 95 棉铃虫核型多角体病毒在生态环境中的滞 留及作用'

张 忠信 张光裕 彭辉 银 陈新 文,_――一一一,―――一-旧科学触蹁章 研 错础 瑚jc『S6:7;

,一'

广7提要棉锋虫核型多角体病毒( № N P V ) 杀虫剂可湿性橱荆防治第三 三 代棉锋虫一 防治效果为 /

8 5 .

2 %. 使用酶 联 免疫法 ( E L I S A ) 检测 棉锋 虫 核型多角体 病毒在 土壤 中的滞 留.结果表 明:施用病 毒 杀虫剂

1 、

3 、

5 、

7 天 和两 十月后 部可检 测副该病 毒的存在 .1

9 9

3 年 9月上 旬从河南 封 丘棉 田采集的 蔺f水.pH为

7 .

9 8 , 病毒 多角体 在露 水II】保存 3天,其生物 活性 无 明显下 降. 关键词核型多角体病毒,酶联免疫,十壤.露水带,宝流, 、 瓣茜棉锋虫核型 多角体 病毒 ( 腩Buclearpolyhedr~sisvirus,简称 H a N P V) 杀虫剂是 一 种具 青广 泛应用前景的 生物 杀虫剂 . 国内已投入工厂化 生产和商 品化经营 : . 施甩病 毒杀虫 剂后 , 凡们不仅关 心近期 防治效果 , I 时且关心昆虫病 毒在生 态环境 中的滞 留和作用 .土壤是 各种昆虫 病 原体 的天 然 储仓 , 酶联免疫 法(ELISA) 是检 测昆虫病 毒在_十壤 中滞 留的灵敏 方法[

2 ] .本文报道 Ha N P V病毒杀虫剂可湿性粉荆在河南封 I 壬棉 田防治效果 , E L I S A检测 昆虫 病 毒在士壤中滞留及棉田露 水对 昆虫病毒滞留的影响. 材料与方 法1HaNP V病毒杀 虫剂 的田问应 用HaNPV病 毒杀虫剂 可湿性 橱剂 由蒋湖 病毒 杀虫剂实验 厂提供 , 商 品名 称 棉烟 灵.田间应 用 方法参照 张光桥等[ I 报道的打法世 行.2HaNPV多角体蛋 白和 病毒粒子 的纯化 参照 于在 林等 : 报 道的方 法.提取的病毒粒 子和 多 角体 蛋 白分 别经 s 叩h a r o ∞

2 a和6B柱层 析,SDS-聚丙烯酰胺电泳, 分光光度计紫外光吸收曲线检测纯度, 病毒拉子并经 K Y K Y - I O O

0 透视电子显横镜检查.

3 病 毒粒 子和 多角体 蛋 白抗 血 清的制备 参照智 再新{ 报道 的 方法 , 选择赶康 家兔一分剐制 备HaNP V病毒粒 子和 多角体 蛋白 抗血清 . 用1琼脂糖双扩散法 分别测 定其 效价和特 异性 .

4 棉 田土 样采 集及滞 留在土 壤中NP v的提取 参照Fuxa 报道 的方法 一 每个处理

5 点 取样 , 采集表 崖 5厘米 的土样 . 采样时 间分 踟 为第二 次施 用HaNPV病毒杀虫剂后 I 、

3 .

5、 7天.两十 月及一年 . 提取 H a N P V时,每十处理 诈取士样

1 0克.加lOml萧馏 求,8O'

C求浴 恒温 1小时 ・ 冷 却后 加入

5 ml 吐温29.4 条件下

0 .

2 t w J l / LN a z C O s 降解 2小时 , 离 心取 卜清,调pH至

7 . 4待用.5酶联免 疫法检 I 土壤中滞 留的 H a NP V _ 车支 于1993午l0月

2 , 5日收到 ,

1 9

9 4午 6月

2 0 H修回 ・ 奉研 兜承 f I I 同科学院封 丘农业 生 态实验站 基盘瓷助 维普资讯 http://www.cqvip.com 第1期张忠信等 : 辅铃虫接型多角体扁毒在生态环境中的滞留殛作用

5 7 酶标节抗免血清 ;

北京生物制品厂出品.聚苯乙烯徽量浦定板 : 上海第三塑料厂生产・ 酶标仪 : 浙江 永嘉 分析仪器 厂生产 . 酶联免疫法的具体操作步骤参考祝庆薹等嘲报道的方法 , 第一抗体稀释度

1 5

0 ・ 每个样品重复