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网址:www.yeasen.com 第1页,共2页HB190701 Hifair? Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit 产品信息 产品名称 产品编号 规格 Hifair? Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit 11145ES50

50 T Hifair? Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit 11145ES70

200 T 产品描述 Hifair? Ⅲ One Step qRT-PCR Probe Kit 是以 RNA 为模板进行定量 PCR 反应的试剂盒.在实验的过程中,逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险.本试剂盒以 RNA 为模板,使用基因特异性引物,利用耐 热Hifair? Ⅲ Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA,并搭配使用探针和 UNICON? HotStart Taq DNA Polymerase,配合 优化的缓冲体系能够特异灵敏的对 RNA 模板进行精确定量. 本试剂盒以预混的 Mix 形式提供, 2*Hifair? Ⅲ P buffer 包含优化的缓冲体系和 dNTPs 等, 优化了有效抑制非特异性 PCR 扩增的因子和提升 PCR 反应扩增效率的因子,适用于荧光标记探针的高特异性检测系统.此外,Hifair? UH Ⅲ Enzymes 包含比例优化的 Hifair? Ⅲ Reverse Transcriptase、RNase inhibitor 及UNICON? HotStart Taq DNA Polymerase 等. 产品组分 组分编号 组分名称 产品编号/规格 11145ES50 (50 T) 11145ES70 (200 T) 11145-A 2*Hifair? Ⅲ P buffer

500 μL

1 mL*2 11145-B Hifair? UH Ⅲ Enzymes

50 μL

200 μL 11145-C Hieff? 50*High Rox

20 μL

80 μL 11145-D Hieff? 50*Low Rox

20 μL

80 μL 11145-E RNase free ddH2O

500 μL

1 mL*2 【注】P buffer 为Probe buffer 的简写,UH 为UNICON-Hifair 的简写. 适用机型 High Rox 适用机型: ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne?, StepOne Plus? Low Rox 适用机型: ABI 7500,

7500 Fast, ViiA?7, QuantStudio?

3 and 5, QuantStudio? 6,7,12k Flex Stratagene MX3000P?, MX3005P?, MX4000P? 不需要 Rox 校正的仪器型号: Bio-Rad CFX96?, CFX384?, iCycler iQ?, iQ?5, MyiQ?, MiniOpticon?, Opticon? , Opticon? 2, Chromo4? Eppendorf Mastercycler? ep realplex, realplex

2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene? Q, Rotor-Gene? 3000, Rotor-Gene?

6000 Roche Applied Science LightCycler? 480, LightCycler? 2.0;

Lightcycler?

96 Thermo Scientific PikoReal Cycler;

Cepheid SmartCycler? ;

Illumina Eco qPCR 运输与保存方式 冰袋运输.-20℃避光保存,有效期

1 年.本品避免反复冻融.建议分装保存. 注意事项 1. 实验过程中请使用 RNase free 耗材. 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作. 上海翊圣生物科技有限公司 客服热线:400-6111-883 E-mail: order@yeasen.com 本产品仅作科研用途! 第2页,共2页反应体系(以20 μL 为例) 组分 加入量 终浓度 2*Hifair? Ⅲ P buffer

10 μL 1* Hifair? UH Ⅲ Enzymes

1 μL - Hieff? 50*High Rox or Low Rox 0.4 μL - Gene Specific Primer Forward (10 ?M) 0.4 μL 0.2 μM Gene Specific Primer Reverse (10 ?M) 0.4 μL 0.2 μM TaqMan Probe (10 ?M) 0.2 μL 0.1 μM 模板 RNA Total RNA:

1 pg-1 ?g - RNase free ddH2O to

20 μL - 【注】:a) 所有试剂使用前应充分混匀. b) 参比染料:Rox 的添加,可根据不同仪器型号进行选择,具体可参考【适用机型】 . c) 引物浓度:通常引物终浓度为 0.2 μM,也可以根据情况在 0.1-1.0 μM 之间进行调整. d) 探针浓度:探针终浓度可在

50 nM-250 nM 之间调整. e) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;

推荐使用带滤芯的枪头.避免交叉污 染和气溶胶污染. f) 模板稀释:一步法 qRT-PCR 灵敏度极高,推荐将模板稀释后(如稀释至 2-5 μL/样本)加入反应体系中,这样可以有 效提高实验的重复性. g) 反应体系:建议以大体系进行实验,如20 μL 或50 μL. 标准扩增程序 反应阶段 温度 时间 循环数