PDF《考马斯亮蓝染色液（常规法）》

推动生命科学,服务人类健康 湖南艾佳生物科技股份有限公司 Tel: 86-731-88915811 Fax: 86-731-88915822 Email: order@auragene.

com Web: www.auragene.com 考马斯亮蓝染色液(常规法) 产品编号: P005D 产品规格: 250ml 产品描述: 本产品是以考马斯亮蓝 R250 为染料, 可用于 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 等蛋白电泳胶的常规染 色,或Western Blot 转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的检测.本产品可以和 Auragene 的考马斯亮蓝 染色脱色液(P006D)配套使用.使用本产品进行染色,采用常规染色方法需至少

1 小时可以完 成染色;

采用快速染色方法数分钟即可完成染色.本产品经过改良,不含有毒的甲醇,但含有刺 激性气味的乙酸. 保存温度: 室温保存;

一年内有效 制品内容: Catalog No. P005D 考马斯亮蓝染色液

250 ml 注意事项:

1 需自备脱色液.脱色液可以选购 Auragene 的考马斯亮蓝染色脱色液(P006D) .

2 可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器.

3 本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护.

4 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作. 推动生命科学,服务人类健康 湖南艾佳生物科技股份有限公司 Tel: 86-731-88915811 Fax: 86-731-88915822 Email: order@auragene.com Web: www.auragene.com 操作步骤:

1 常规染色脱色方法 a、电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶;

b、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色

1 小时或更长时间;

注:具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度.凝胶较厚,温度较低,则染色时间宜适当延长.凝胶较 薄,温度较高,则染色时间可以适当缩短.通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近,在染色液中几乎看 不清凝胶时,可以认为已染色充分.染色 2-4 个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响. c、倒出染色液.染色液可以回收重复使用至少 2-3 次;

d、加入适量脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶;

注:脱色液可以选购 Auragene 的考马斯亮蓝染色脱色液(P006D) ;

如果希望自行配制,推荐的脱色液配方为: 40%乙醇,10%乙酸,50%蒸馏水.也可以使用其它适当的脱色液. e、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色 4-24 小时.期间更换脱色液 2-4 次,直至蓝色背景基 本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期.通常蛋白条带在脱色 1-2 小时后即可出现;

注:脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,可以使部分染料吸附在吸水纸上,加快脱色.脱色时间过长也会 导致蛋白条带的颜色变浅. f、完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等.保存在水中的凝胶会发生溶涨.如需避免溶 涨,可以把胶保存在含 20%甘油的水中.长期保存可以制备干胶.

2 快速染色脱色方法 a、电泳结束后,取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热. 通常对于胶浓度大于 10%的胶比较坚韧,在发生煮沸时不易破损;

对于胶浓度小于 10%的胶,宜尽量 避免煮沸,以免出现胶碎裂的情况;

b、随后在染色液温度较高的情况下,在室温摇床上摇动 5-10 分钟;

c、倒出染色液.染色液可以回收重复使用至少 2-3 次;

d、加入适量脱色液,确保染色液可以充分覆盖凝胶;