DOC《凝胶色谱LC-20AD操作步骤》

凝胶色谱LC-20AD操作步骤 使用前缓慢水平摇动样品瓶,使样品浓度均匀,且瓶壁无气泡.

使用色谱纯级溶剂和超纯水来配制流动相,超声脱气.提示:超声15min,恢复到室温后才可使用. 分析操作步骤 开机及平衡过程 打开空调,使室内温度保持在25℃左右. 打开电脑及仪器(包括输液泵LC-20AD、自动进样器SIL-20A、检测器、柱温箱CTO-20A),打开氮气钢瓶解压阀,调节压力使蒸发光散射检测器压力维持在350kPa. 提示:在打开仪器的时候,通常控制器最后开. 运行LCsolution. 双击电脑桌面,打开LCsolution程序,点击第一个图标. Login窗口点击OK,无密码. 仪器自动加载方法参数. 流动相流速(pump a flow):0.5ml/min 柱温(oven temperature):40℃(与检测器温度相同) 分析时间:30min 输液泵排气:逆时针拧开LC-20AD排液阀,按purge按钮,3min后自动结束,顺时针拧紧排气阀.提示:排液阀拧开不要超过180度,否则反而容易在purge时引入气泡. 进样器冲洗:按自动进样器上purge按钮,25min后自动结束;

平衡GPC柱:待1.1.5结束后,按(Instrument On/Off)使仪器按照方法参数开始运转,一般60min左右基线可以走平.提示:可以与1.1.6步同时进行. 分析操作过程 放入样品瓶,记录放置孔号.提示:样品架应推倒底,瓶垫应该白色朝上. 编辑批处理表 右侧助手烂点击"Batch processing" New;

输入第一个样品进样器孔号(Vial#),右键fill detail;

跳出窗口中依次填入行数(由第1行到第6行)、第一个样品孔号(2)与重复次数(1次);

点击"OK";

依次输入sample name(样品名)、sample ID(样品编号);

method file列中输入方法文件(*.lcm文件),左键选定列,右键单击,选择fill down向下填充;

确定数据文件保存地址及名称;

输入进样体积:50μl-8μl(标样浓度高则进样量少,低则进样量多;

所有的标准品和代测样品应该采用相同的进样体积);

保存批处理文件. 运行批处理表.点击Batch start按钮,开始进样. 分析完冲洗及关机过程 1.3.1 栏图标,停止温控. 1.3.2 mL/min流速流入填充柱,直至柱温冷却至室温;

1.3.3 rument on/off" 1.3.4依次关闭程序、电脑、仪器及氮气 分子量计算过程 以sample目录下的演示文件为例介绍分子量校正曲线制作及操作过程. 样品平均分子量计算 双击打开未知品数据文件GPC_Data-005. 单击Method标签. 将标准曲线方法拖到右边的色谱图窗口中,加载方法参数. 出现选择方法参数对话框,直接单击OK. 单击工具栏Molecular Weight Distribution按钮. 查看分子量计算结果.