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西北植物学报! ! " # $! % $ " # # $ " " & "'" " & ( ! " # $% & #' % & ( ) $ * ' + , " " - .

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2 # 作者简介$ 赵瑞丽" #

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2 3 $基因的克隆及表达分析 赵瑞丽 钟凤林 林义章 高世超 林俊芳 杨碧云 胡海非 " 福建农林大学 园艺学院! 福州 % ( " " " ! # 摘要$ 采用3 < => ) > ? @ A和B>C4技术从小白菜中克隆得到泛素结合酶

4 !基因" D E - F D - G - /3 : / , D H

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4 ! # ! 命名为 ! " # ! $ % !'序列分析表明! ! " # ! $ % !基因3 < => 全长1 % "E J ! 包含#个$ ( &E J的开放阅读框! 编码 # ( !个氨基酸'结构分析发现! 该序列包含一个泛素结合酶

4 !活性位点和一个高度保守的半胱氨酸'进化分析 显示! 小白菜 K

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4 !蛋白同拟南芥

4 !蛋白的亲缘关系最近'F B M ) A C B 分析表明! ! " # ! $ % !基因在小白菜根( 茎( 叶中均有表达! 铜处理# "N时!"#!$%!基因的表达量最高'研究认为! ! " # ! $ % !基因可能在铜胁迫响应中 发挥重要作用' 关键词$ 小白菜& 泛素结合酶

4 !& B > C 4& 铜胁迫 中图分类号$ O +

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9 I . . 泛素)蛋白酶体途径"DE-FD-G-/)J9:GI6.:5IJ6GV[6;

!LAA# 广泛 存在 于真核 生物中! 对蛋白质 的降解具有高度选择性! 它通过调节功能蛋白质的 周转或降解不正常的蛋白实现对多种代谢过程的调 节! 在维持细胞功能以及周期运转! 抵御环境胁迫! 胚胎发育! 激素响应和衰老等方面发挥着重要的作 用) # ) (* '泛素结合酶4!" D E - F D - G - /3 : / , D H

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5 I4 !# 是LAA途径的关键作用酶之一! 具有结 合并转移泛素到靶蛋白的作用! 决定泛素链长度( 拓 扑结构和蛋白泛素化效率) &* ! 对泛素化修饰的特异 性和精确性起着关键作用) $ ) (* '有研究表明! 干旱( 重金属( 高温等非生物胁迫因素能够诱导植物泛素 结合酶

4 !基因表达! 从而提高植物适应不良环境 的能力'目前! 泛素结合酶4!基因响应干旱( 高盐( W > 及重金属汞的研究已有报道) + ) 2* ! 而关于该基 因响应铜胁迫的研究尚未见报道' 小白菜" ! & ' ( ( ) " '" * ) + , + ( ) ( @* # 是十字花科芸薹属植物! 营养价值较高! 栽培面积较广! 是备受人 们喜爱的蔬菜之一'近年来! 由于含重金属农药( 化肥( 有机肥的使用以及工业废水的排放! 使得土壤中 铜含量越 来越高! 严重影响了小白菜的产量和品质) # " ) # %* '因此挖掘小白菜自身所具有的抗逆基因! 研究其机理和通过操纵这些抗逆基因的表达提高小 白菜对不良环境的适应能力就显得非常重要'本试 验应用3 ) > ? @ A"

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9 J V - . 5# 技术分析# "5 H % @铜胁迫下 小白菜基因的差异表达! 得到了与小白菜铜胁迫相 关的泛素 结合酶4!基因的差异表达M