PDF《洋葱大葱种问杂种鉴定方法建立与应用》

植物遗传资源学报201 l,12(4):657―661 Journal of Plant Genetic Resources 洋葱大葱种问杂种鉴定方法建立与应用 田保华∽,粱毅2,陈丽2 ,王永勤2,裴雁曦1 (1山西大学生命科学学院.

太原030006 2北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;

3华中农业大学园艺林学学院,武汉430070) 摘要:以洋葱、大葱及其杂种F.为材料,利用PCR-RFLP技术对其核糖体DNA内部转录间隔区(ITS)和细胞质线粒体 DNA的srRNA基因V7进行分析,试图建立洋葱大葱种间杂种的鉴定方法.结果显示:大葱ITS序列没有Dde I酶切位点;

而 洋葱被Dde I酶切成两个大小不同的片段;

F,杂种具有两亲本的ITS序列酶切模式.细胞质线粒体srRNA基因的V7区域的 扩增表明F,杂种和亲本有大小一致的单一片段,经Rsa I酶切后,大葱有约0.3kb条带,比洋葱的稍小,两亲本都舍有另外一 条小条带(约0.1kb).对25份杂种材料进行鉴定,22份的母本为大葱,3份为假杂种.本研究在分子水平上建立了洋葱大葱 种闻杂种的鉴定方法,快速、准确地辨别杂种一代的真假性. 关键词:洋葱;

大葱;

种间杂种;

nrDNA ITS序列;

mtDNA Establishand Applications of Identification Interspecific Hybrids between Onion and Welsh Onion TIAN Bao.hual ,LIANG Yi2,CHEN Li2 ,WANG Yong.qin2,PEI Yan.xil (1 School of Life Science,Shanxi University,Taiyuan 030006;

2Belting Vegetable Research Center,Beijing Academy ofAgriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097;

3CDliege ofHorticulture Foresty&

Sciences.日Ⅱazhong Agricuhure University.Wuh口n 430070) Abstract:Onion,Welsh Onion,and their Fl progenies were applified to establish a method for interspeeific hy― brids identification by using PCR-RFLP.The results showed that rDNA internal transcription spacers(ITS)of Onion could be digested into two restriction fragments with endonuclease Dde I,while no Dde I restriction site was found in Welsh onion.Welsh onion hold a restriction fragment of approximately 0.3kb after the PCR products of V7 region of mitochondria srRNA was digested with Rsa I,which was slightly shorter than that of onion.Of the

25 FI hybrids ana― lyzed in this paper,22 were true Fl,while the other three ones were false hybrids.The present research established a easy and accurate method for interspeeific hybrids identification between Onion and Welsh onion. Key words:Onion;

Welsh Onion;

Interspecifie hybrid;

nrDNA ITS;

mtDNA 洋葱(Allium cepa L.)和大葱(AUium fistulosum L.)为具有经济价值的可食用葱属植物,被广泛种 植和消费….然而在洋葱、大葱生产中存在诸多问 题,如病虫害严重,抗旱、抗涝、抗风、抗倒伏性、耐热 等多抗品种及晚抽薹等不同生态类型品种均较少, 雄性不育资源单一,这给洋葱、大葱安全生产带来较 大的风险旧1.因此,进行种质资源的创新具有重要 意义. 远缘杂交是导人异源优良性状,培育高产、优质、抗病虫和抗逆优良作物品种的有效途径之一. 洋葱具有碳水化合物、钙、类黄酮含量高等优良特 性旧1,大葱可抗洋葱黑粉病、粉根病、蓟马、洋葱灰 霉病、炭疽病、洋葱黄矮病毒和洋葱蝇H引,本研究 通过对洋葱和大葱进行远缘杂交,利用子房培养技 收稿日期:2010―08―27 修回日期:2011―04.21 基金项目:国家自然科学基金(31071794);

国家公益性行业科技(20093018);

北京市常规育种财政专项(2009-509);

农业部

948 项目(2011一Z61) 作者简介:田保华,硕士研究生,主要从事植物分子遗传学研究.E―mail:tbh 3893765@163,OOrll 通讯作者:王永勤,博士,副研究员.主要从事蔬菜遗传育种研究.E-mail:wyqty@sohu.cam 裴雁曦,博士,教授.主要从事植物分子遗传学研究.E―mail:peiyaaxi@8XU.edu.cn 万方数据