PDF《ICS 11.080》

抑菌率≥90%,判有较强抑菌作用. 5.1.3 载体抑菌试验 5.1.3.1 适用范围 适用于含溶出性抑菌成分的湿巾、无纺布口罩、卫生巾、护垫、尿布等固体类抑菌产品对微生物抑 菌效果的测定. 5.1.3.2 试剂、培养基及器材 见5.1.1.2. 5.1.3.3 试验步骤 取试验菌24h新鲜斜面培养物用PBS洗下, 用PBS稀释至约10

5 CFU/mL~10

6 CFU/mL, 制成菌悬液备用. 用灭菌剪刀在无菌条件下将试验样品和对照样品分别剪成20 mm*30 mm样片备用.试验时滴加0.1 mL 菌悬液.对照样片染菌前需经压力蒸汽灭菌. 取无菌平皿,用无菌镊子取2片试验样片, 勿重叠,置20℃ ±1℃水浴5min,在每一样片上滴加0.1 mL试验用菌悬液,立即计时.待试验菌与样片接触作用至说明 书的规定时间,分别夹取染菌样片加于5.0 mLPBS试管中,混匀.振荡洗脱,分别吸取1.0 mL样液,按 活菌培养计数方法测定存活菌数,每管样液接种2个平皿.如平板上生长的菌落数较多时,可10倍系列 稀释后,再进行活菌培养计数. 同时用与试验样品同质材料不含抑菌成分的对照样片2片代替试验样片进行试验,作为阳性对照, 阳性对照回收菌量为1.0*10

4 CFU/片~9.0*10

4 CFU/片;

取同批次PBS、培养基作阴性对照. 所有试验样本和对照样本均在36℃±1℃培养,细菌繁殖体培养48h、白色念珠菌培养72h观察最终 结果.试验重复3次,计算抑菌率. 5.1.3.4 抑菌率计算 见式(2). 5.1.3.5 结果判定 抑菌率≥50%~90%,判有抑菌作用;

抑菌率≥90%,判有较强抑菌作用. 5.1.4 抑菌环试验 5.1.4.1 适用范围 适用于含溶出性抑菌物质,可制成直径为5 mm片状物的固体抑菌产品的抑菌效果鉴定;

也可用于鉴 别抗抑菌样品中是否含有可溶性抑菌物质. WS/T 650―2019

5 5.1.4.2 试剂、培养基及器材 游标卡尺,其它见5.1.1.2 5.1.4.3 试验步骤 将试验菌24h新鲜斜面培养物用PBS洗下,稀释至5.0*10

5 CFU/mL~5.0*10

6 CFU/mL备用. 抑菌片的制备:溶出性固体抑菌产品,直接制成直径为5 mm,厚度不超过4 mm圆片(块),每4片 为一组. 阴性对照样片的制备:取同种材质不含抑菌成分的样本,制成与试验组大小相同的圆片(块). 用无菌棉拭子蘸取浓度为5.0*10

5 CFU/mL~5.0*10

6 CFU/mL试验菌悬液,在适宜的培养基平板表 面均匀涂抹3次.每涂抹1次,平板应转动60°,最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周.盖好平皿,置室温 干燥5min. 每次试验贴放1个染菌平板,每个平板贴放4片试验样片,1 片阴性对照样片,共5片.用无菌镊子 取样片贴放于平板表面,阴性对照样片贴于平板中心位置,试验样片贴于四周,贴放好后,用无菌镊子 轻压样片,使其紧贴于平板表面.各样片中心之间相距25 mm以上,与平板的周缘相距15 mm以上.盖好 平板,置36℃±1℃培养16h~18h观察结果,试验重复3次. 用游标卡尺测量抑菌环的直径(包括贴片)并记录,测量抑菌环时,应选均匀而完全无菌生长的抑 菌环进行,测量其直径应以抑菌环外沿为界. ........