PDF《使用说明书》

磁纳米・微萃取:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案

1 生化科技 Enriching Biotechnology 使用说明书 【产品名称】羧基琼脂糖磁珠 【产品型号】MAg25K/Carboxyl 【目录号】P01 【产品介绍】 Enriching Beads? 羧基琼脂糖磁珠以交联琼脂糖为基质,拥有良好的刚性、磁响应 性和单分散性,表面修饰有丰富的羧基(-COOH),能够与含伯胺基的生物配体,如:蛋 白质、抗体、寡聚核苷酸和药物分子等通过共价偶联的方法实现结合,是一种分子生物 学和医学研究的重要载体工具.

【产品规格】 平均粒径 25?m 固形物浓度 10% (v/v) medium slurry 分散液 H2O 表面配基含量 60~100?mol/mL 纯磁珠(100% v/v) 【产品特点】 ? 良好的磁响应性;

? 生物样品中良好的分散性;

? 良好的物理化学稳定性;

? 丰富的配体特异性结合位点;

? 高结合载量;

? 低非特异性吸附. 【作用对象】适用于含伯氨基的蛋白、多肽、核酸、药物等生物配体. 【有效期】两年(2~8 ℃保存). 【偶联准备】 1. 离心管,磁力架;

2. 反应缓冲液:0.1M MES, 0.15M NaCl, pH6.0;

3. 封闭缓冲液:0.2% BSA, 0.1M MES, 0.15M NaCl, pH 6.0;

4. 清洗缓冲液:50mM Tris-HCl, 0.15M NaCl , pH7.2;

5. 需要偶联的目标蛋白、抗体等生物配体;

6. 偶联活化剂(EDC.HCl 溶液):用反应缓冲液配置为 20mg/mL 浓度,现配现用. 【操作流程】 1. 将磁珠混合均匀, 取1mL 磁珠(10%,v/v)加入到 2mL 离心管中, 磁性分离去除上清液. 磁纳米・微萃取:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案

2 生化科技 Enriching Biotechnology (注:"磁性分离"指将离心管置于外加磁场中,至磁珠吸附完全,约需要 30s.) 2. 加入 1mL 去离子水,混合均匀,磁性分离去除上清液(重复

2 次);

3. 加入 500~1000?L 反应缓冲液,混合重悬磁珠,磁性分离去除上清液(重复

2 次);

4. 加入 200~400?L 反应缓冲液,混合重悬磁珠;

5. 加入 200?L 现配偶联试剂(EDC.HCl 溶液),室温旋转混合 30min;

6. 加入 200~400?g 抗体或者蛋白质溶液(提前用 500?L 反应缓冲液溶解),室温旋转混 合12~16hr,磁性分离去除上清液;

7. 加入 1mL 封闭缓冲液,混合重悬磁珠,室温旋转混合 2hr,磁性分离去除上清液;

8. 加入 1mL 清洗缓冲液,混合重悬磁珠,磁性分离去除上清液(重复 3~5 次);

9. 将上述磁珠分散于 0.5mL PBS, pH 7.4 短期保存,或分散于 PBS, pH 7.4, 0.1%BSA,0.02%NaN3 长期保存. 【注意事项】 1. 偶联过程中不应含有除目标配体外含伯胺基团的物质,如:甘氨酸、BSA、Tris-HCl 等,请注意您的抗体溶液是否含有上述物质;

2. 磁珠使用和保存过程中应避免反复冻融;

3. 羧基琼脂糖磁珠不可干燥;

4. 不同抗体和蛋白与羧基琼脂糖磁珠的结合能力不同, 客户可自行优化加入不同的抗体 或者蛋白质量;

5. 偶联过程无需移除 EDC 溶液,可适当提高 EDC 溶液浓度来提高偶联效率. 【其它】 该产品可配合英芮诚核酸提取仪(订货号 ETP-300)进行自动化操作 ,也可以配合多功 能磁力架(订货号 CQT-0011)、16 位磁力架(订货号 CQT-0001)、手动磁性萃取指 套(订货号 CQT-0008)进行手动操作. 英芮诚生化科技(上海)有限公司 地址:上海市杨浦区翔殷路

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