PDF《尺蠖嗡 型多角》

f 一第10卷 第1期1995年3月中国病毒学V【 R0L0GI CA sI N I CA f D ) v0 I .

】 O No.1 Ma r .

1 凹5油桐尺蠖核型多角体病毒感染 B s

4 8

4 细胞 的研究 徐旭士(南昌大学生物工 程研 究所 . 南昌330047)张超英(南昌大学应 用化学研 兜所 . 南昌3,30047)谢天恩(中国科学院武设病毒研究所 . 武设

4 3

0 0

7 1 ) % / ;

4 、 ,

7 提要 本文报道利用油桐尺蠼桂型多角体病毒感染处于不同培养基及不同培养时间的 P , s

4 8 4细胞 的部分感染效果和特征. 结果表明, 细胞培养基的类型和细胞传代后的时间对病毒感染率和多角体 产量及其 它感染特征都有比较 明显 的影 响一经过比较 . 处于Gr 噼 培养 基组 的传代后 三天的1~4

8 4细胞 屉一个 理想 的NP V感染 受试 系统 .同时发现 . 健康的 油桐 尺蠖血 淋巴具 有提高 细胞活 性 及病 毒感 染效果的 作用. 关键词油桐尺蠖嗡型多角体病毒,病毒感染蝙毒-油桐 尺蠖核型多角体病 毒( B s u p p r e . g s a r m n u c l e a r

1 ) o i y h e d ~ o s i s" ~ - i I " I L L ~ , B s l ~ r P V) 是生物防治 的一类重 要杀虫资源 , 该病毒的毒力强 . 对寄主昆虫油侗尺蠖有强烈的毒杀作 用;

其大 田应 用 已具有一定规模 , 并 受到 人们的广泛关注. 就一个病 毒一 宿主细胞系统而 言,病毒的感染不仅 取 决于病毒的感 染力 , 而且与敏感细胞 的生活状态密切相关 .通过 对某一特 定的病毒一 宿 主细胞 的感染特征及效果研 究,对于进一步 了解病毒与宿 主细胞的相互 关系以及如何 利 用体 外细 胞 生产昆虫病毒杀虫剂等问题具有重要意义 .本文就 ] ~ N P V感 染处于不 同培养条件的 B s

4 8 4细 胞作了部分实验研究 , 并将结果 报告 如下 . 材料与方 法I供试 病毒 F I s N P V多角体 添 食感染 三龄 油桐尺蠖幼 虫,四天后取 病虫血 淋巴

4 0

0 O f / r a i n离心

3 0分钟 . 清用0,d散孔滤 幢过 滤 除苗 . 滤 液接 种8s484细胞 P q 天后 的培 养物, 卜清即为本 实验 的感染 毒源 .

2 供 试纽胞 油桐 尺蠖 成虫卵巢细 胞系(I~4

9 4 ) [

1 ] . 所 用细 胞培 养基 分别 为CrraccC,TCI O

0 E "和M. M[ ". 外加IO的小 牛血 清 .细胞分 别培 养在 G t & c c . T cI O

0 . M― M " 及在这 i种培 养基 巾分 别加入 了终 浓度 为0.5%的健康油 桐尺 蠖Pq龄幼虫 血淋 巴( 离心际 去血 细胞的 血浆) 的六手 培养基 , I I . ・ 车文于1993年11月29日收到 .

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9 4 午 2月

2 0日修回 维普资讯 http://www.cqvip.com 中国病毒学第9卷

3 病毒 感染纽 孢的 方法 取 生长良好并 已贴壁的细胞 , 倾去上层培养藏 . 用无血清的细驰培养基洗涤细胞 , 加入病毒藏 ,

2 6 " C 静置 吸附细胞-J J , 时,弃去病毒藏 . 加入新鲜培养基 . Z

6 " C 培养.感染细胞的判定 棱内出琨多角体为标准 . 病毒 感染宰 和纽 l 眵 角体救 的计算

4 .

1 病毒感染的细胞制成均匀的细驰悬蔽 , 用血球计数板计算感染细胞的百分比 , 每十样品计数四次 , 取其 平均值 . 此为病毒感染率 .

4 .

2 病 毒感 染后 的细胞

3 0

0 0 r / n ~ n 离心20分钟,细胞 沉淀按 K c n - - i c b

1 1 " o的方 法嘲收 集 多角体 . 用血球 计 数板 计算每毫升培养物中的多角体数 , 采用四次计数的平均疽. ;

测定 测 定工 作按镣 旭士 的方 法进行. 结果和分析 l 病毒感染 不同培 养时间的细胞 的感染 率差异 用六种不 同的培养基培养 B s