PDF《Helios》

46 In Indium

49 Au Gold

79 Cd Cadmium

48 Te Tellurium

52 Sn Tin

50 Sb Antimony

51 Rn Radon

86 I Iodine

53 Xe Xenon

54 Ag Silver

47 Hf Hafnium

72 Ta Tantalum

73 W Tungsten

74 Re Rhenium

75 Os Osmium

76 Hg Mercury

80 Tl Thallium

81 Pb Lead

82 Bi Bismuth

83 At Astatine

85 Po Polonium

84 Cs Caseium

55 Ba Barium

56 Ac Actinium

89 Rf Actinium

104 U Uranium

92 Pa Protactinium

91 Np Neptunium

93 Pu Plutonium

94 Am Ameriicium

95 Cm Curium

96 Bk Berkelium

97 Cf Californium

98 Es Einsteinium

99 Fm Fermium

100 Md Mendeleviur

101 No Nobelium

102 Lr Lawrencium

103 Fr Francium

87 Ra Radium

88 Db Actinium

105 Sg Actinium

106 Bh Actinium

107 Hs Actinium

108 Mt Actinium

109 Uun xxxxx

110 Uuu xxxxx

111 Uub xxxxx

112 Uuq xxxxx

114 Uuh xxxxx

116 通道数 Helios 将质谱流式的检测通道数量扩展到

135 个,可以满足对生物样本全面分析的要求;

也为未来新标签的加入做 好了准备. PANELS Fluidigm 公司目前提供几百种预标记金属标记抗体以及一系列针对具体应用的 Panel 试剂盒.这些试剂可以结合组 成更大的 Panel,对细胞系统进行深入的分析. 分辨率 Helios 采用飞行时间质谱(TOF)技术,具有极高的信号分辨能力,可以将各个同位素标签的信号完全分开,最大 限度减少 串色 的发生. 实验通量 使用基于钯元素(Pd)的Barcoding 技术,可以将不同样本合在一起染色、检测.这样,在提高数据质量的同时, 也提高了实验通量,是您能够更加精确、高效的分析各个实验变量. 目前可以使用的元素标签:来自

24 种元素的超过

50 种稳定同位素;

质谱流式实验流程 Panel 设计 体系构建 样品制备 数据收集 数据分析 Panel 设计:MaxPar Panel Designer 软件 MaxPar Panel Designer 是基于网页的、半自主式的质谱流式 Panel 设计软件,大大简化了 Panel 设计流 程,帮助研究者确定最优化的实验方案. 体系构建:Maxpar 系列试剂 Fluidigm 提供

400 多种预标记抗体,可以覆盖人和小鼠的诸多应用,包括表面 Marker、细胞因子、信号 通路分子、细胞凋亡、细胞周期等.对于常见的应用,Fluidigm 还提供针对性的 Panel 试剂盒.此外, 研究着还可以利用抗体标记试剂盒来标记自己需要的特殊抗体,总共

35 种标签,选择更加灵活. 样本制备:成熟的 Protocols,缓冲液与 Barcoding 试剂 Fluidigm 还提供 MaxPar 系列缓冲液和经过优化验证的 Protocol,不论对于表面 Marker 还是胞内蛋白, 都可以保证最佳的实验效果.利用 Cell-ID Barcoding 试剂,可以显著减少由于偶然因素引起的样品间误 差,同时还可以提高实验的通量. 数据收集:Helios 质谱流式系统 Helios 质谱流式系统具有更友好的用户界面,更流畅的使用流程,使研究工作更加顺畅简单. 该系统主要进行了以下关键改进: ? 更多的检测通道,可以支持更灵活的 Panel 设计 ? 提高灵敏度,提升对低丰度目标的探测能力 ? 新的加样系统,简化操作步骤、节约时间 ? 新的用户界面,简化了数据采集 ? 更快的样本采集速率,减少数据收集时间 ? 自动系统校准,以保持系统的峰值性能 数据分析: Cytobank Helios 系统得到的数据形式是与传统流式相同的 FCS 流式文件,因此可以用 Flowjo 等传统流式分析软件进行分 析.但是,由于其检测通道较多,其内部所包含的信息量极大.因此,还需要用一些高级数据处理手段对其中的 有用信息进行深度挖据.Cytobank 是一个基于云的数据分析网站,可以提供高级的数据降维处理工具(SPADE、 viSNE 等),将高维数据可视化.此外,Cytobank 还可以对数据进行总结分析,提供热图、剂量反应曲线等等 数据结果. 技术支持和培训 Fluidigm 公司承诺为 Helios 这一先进的质谱流式系统提供完备的技术支持. Fluidigm 一直致力于生命科学前沿技术的开发研究,帮助研究者突破技术限制,探索未知领域,取得更多创造性 的研究进展.为研究者提供先进的仪器只是第一步,公司还为客户提供了全套的培训和支持计划,使客户能够快 速掌握 Helios 技术要领,全身心投入相关领域的研究工作. 质谱流式的工作原理 一系列金属标记抗体与细胞内外的蛋白特异结合.高纯度的金属同位素标签保证了最低的背景和最 小的 串色 . 在Helio 仪器内,细胞被逐个的送入等离子炬中进行离子化,使标签金属离子释放出来.在此 过程中,一个细胞会形成一个独立的等离子云. 各种标签金属离子被送入飞行时间检测室 (time-of-flight chamber) 中进行分离检测. Bivariate plot SPADE Heat map 检测器会精确记录各种离子到达的时间,根据这些结果可以计算出每个细胞中各种标签同位 素的精确含量. 随后,这些单细胞的质谱数据被转化为标准 FCS 流式文件,可以使用 Cytobank 或者其他流式分析 软件进行分析.质谱流式数据分析方法非常灵活,下图展示的是一个样本同时进行热图、SPADE 以 及二维散点图分析,如下图所示: MaxPar 金属标记抗体 对于常用抗体,Fluidigm 提供了预标记的金属标记抗体,可 以根据需要灵活选择. MaxPar Panel 试剂盒 Panel 试剂盒提供了分析人或小鼠特定组织的全套试剂,主要 包括以下三部分: 良好的质控,保证最佳的实验结果;