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深圳市达科为生物工程有限公司 地址: 深圳市坪山区坑梓街道金辉路

14 号深圳市生物医药创新产业园区

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702、

703 邮编:518122 Tel:0755-86235300 Fax:0755-86235303 Web:www.

dakewe.com E-mail:RD@dakewe.com SuperCulture ? L500淋巴细胞无血清培养基(GMP)说明书 Cat#:6811021 产品描述: SuperCulture? L500 淋巴细胞无血清培养基(GMP)(Serum-Free Medium for Lymphocyte (GMP))是本公司在 SuperCulture? L100 淋巴细胞无血清培养基的基 础上开发出的升级版培养基,适用于人淋巴细胞的体外培养.本产品是一款化学 成分限定的培养基, 该培养基中的所有成分均使用细胞培养级别的原料生产,不 含异种动物成分,不含血清,除白蛋白、转铁蛋白和胰岛素外不含其他任何蛋白 成分,有效避免血清质量变动及血清组分、外源成分对实验研究的影响,可实现 人淋巴细胞、CIK 细胞、NK 细胞、DC 细胞等免疫细胞的高密度培养. 包装规格: 货号 名称 规格

6811021 SuperCulture ? L500淋巴细胞无血清培养基(GMP) Serum-Free Medium for Lymphocyte(GMP) 1000mL 使用方法: SuperCulture? L500淋巴细胞无血清培养基(GMP)可支持淋巴细胞的高密度 悬浮培养.在静态培养容器中,支持细胞密度为5*

105 ~5*

106 个/mL的淋巴细胞悬 浮培养,为保证培养体系良好的气体交换,推荐培养基的深度为1~1.5厘米.该培 养基支持在生物反应器高密度培养淋巴细胞,对培养程序的优化由研究者根据经 验决定. SuperCulture? L500淋巴细胞无血清培养基(GMP)支持免疫细胞的无血清培 养,但加入自体血浆、人AB血清、FBS或血清替代物可显著改善细胞状态,提高 细胞增殖速率.推荐使用达优SUPERGROW? 细胞培养添加物(Cat#: 6122011/6122012) ,以获得最优培养效果. 例:CIK扩增培养 1. 将SuperCulture? L500 淋巴细胞无血清培养基(GMP)放置室温平衡. 以下均为无菌操作: 2. 无菌分离人外周血淋巴细胞(建议使用达优人淋巴细胞分离管/分离液, Cat#:7912011 / 7922021). 深圳市达科为生物工程有限公司 地址: 深圳市坪山区坑梓街道金辉路

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703 邮编:518122 Tel:0755-86235300 Fax:0755-86235303 Web:www.dakewe.com E-mail:RD@dakewe.com 3. 使用 SuperCulture? L500 淋巴细胞无血清培养基(GMP)将分离获得的 PBMCs 按2~2.5*

106 个/mL 的浓度接种于 T75 或T175 细胞培养瓶中,加入重组 人IFN-γ 等(建议使用达优 CIK 细胞因子套装,Cat#:6141011) ,37℃,5%CO2 培养箱中培养. 4. 24hr 后,即第

1 天加入 CD3 单抗、重组人 IL-2 等,刺激 CIK 细胞的生长 和增殖. 5. 从第

4 天开始,每两天取样计数细胞浓度并根据计数结果补充新鲜的 SuperCulture? L500 淋巴细胞无血清培养基(GMP) (含1000U/mL 的重组人 IL-2) , 调整细胞浓度为 1.5*

106 个/mL. 6. 第7天左右,根据细胞培养悬液体积选择扩瓶或转入细胞培养袋,T75 培 养瓶最大培养体积 40mL,T175 培养瓶最大培养体积 200mL,当培养基体积超 过200mL 时,可转入细胞培养袋中培养. 7. 细胞增殖和细胞表面标志物检测. 保存方法: 2℃~8℃,避光保存,保持无菌,保质期

12 个月. 注意: ? 本品避免反复冻融,使用时注意无菌操作. 相关产品: 货号名称规格6111021 SuperCulture? L500 淋巴细胞无血清培养基 1000mL/瓶6111031 SuperCulture? L500 淋巴细胞无血清培养基 (无酚红无抗生素) 1000mL/瓶6911011 SuperCulture? L100 淋巴细胞无血清培养基 1000mL/瓶6141011 细胞因子套装(CIK 专用) 2*500μL