PDF《持久性化学发光底物》

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网址:www.yeasen.com 第1页,共2页HB180824 SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate 持久性化学发光底物 产品信息 产品名称 产品编号 规格 储存 SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate 持久性化学发光底物 36223ES10 10ml 4℃ 36223ES60 100ml 4℃ 36223ES70 200ml 4℃ 36223ES76 500ml 4℃ 产品描述 翊圣 ECl 系列发光试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体及其关联的抗原.其原理是,蛋白质 或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以一抗及 HRP 标记的二抗结合膜上的目的蛋白,或以 HRP 标记的探针直接或间接结合膜 上的核酸.洗膜后用本产品配制的 ECL 工作液,室温孵育膜数分钟,将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于 X 光片曝光暗盒. 然后转入暗室将 X 光胶片压在膜上曝光数秒到数小时,显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在 X 光胶片上. 本试剂盒(SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate)采用了独特的发光/增强底物系统,可实现中等飞克级的免 疫印迹检测.除用于 X 光片,还可通过 CCD 成像仪检测. 产品特点 1)具有极高灵敏度和高信噪比,可检测中等飞克级抗原;

2) 信号可持续

24 小时,发光时间比常规 ECL 底物长

10 倍以上;

可通过多次曝光获得用于发表论文的高品质印迹图像;

3)可使用较高的抗体稀释倍数,大大节省抗体: 一抗(储液浓度 1mg/ml)稀释倍数:1:1000-1:50000;

二抗(储液浓度 1mg/ml)稀释倍数:1:50,000-1:250,000. 产品组分 组分编号 组分名称 产品编号/规格 36223ES60(100ml) 36223ES70(200ml) 36223ES76(500ml) 36223-A SuperDura ECL-A 液50ml 100ml 250ml 36223-B SuperDura ECL -B 液50ml 100ml 250ml 运输与保存方法 常温运输.4 ?C 保存. 【注】 :A 液(36223-A)需避光保存!有效期

1 年. 上海翊圣生物科技有限公司 客服热线:400-6111-883 E-mail: order@yeasen.com 本产品仅作科研用途! 第2页,共2页操作方法 【较理想的 Western blot 结果需要优化所涉及的各个实验环节,如样品上样量、凝胶类型、转膜方法、膜类型、封闭试剂、 一抗浓度、二抗浓度及相应孵育时间等.另外,每个环节尽量提供足量的孵育试剂,以避免膜干燥. 】 1. 执行常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或者 HRP 标记核酸探针孵育、洗膜. 【注】 :ECL 发光液是 HRP 的显色底物,因此检测系统最终必须基于 HRP 酶标记抗体或者核酸探针. 2. 最后一次洗膜的同时,新鲜配制发光工作液:分别取等体积的 A 液和 B 液,混匀后,室温放置备用. 【注】 :取A液和 B 液一定要用不同的枪头;

3. 用平头镊取出膜,搭在滤纸上沥干洗液,勿使膜完全干燥.将膜完全浸入发光工作液(100~200μl 发光工作液/cm2 膜)中, 与发光工作液充分接触.室温孵育 3-5 分钟,准备立即压片曝光. 【注】 :孵育时间过长不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常.发光过程的本质是酶促反应,使用过少的发光工作 液不利反应进行,也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度.为达节约目的可将膜剪小,但勿降低发光液使用比例. 4. 用平头镊子夹起膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,去除膜上多余的液体,留下少量工作液,不可让膜完全干燥.不可洗去 发光液. 5. 在X光胶片暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜.将印迹膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹印迹膜,去除气 泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜.用滤纸吸去多余的发光工作液.用胶带将覆盖印迹膜的保鲜膜固定在暗盒内,蛋 白带面向上. 6. 暗房内取一张 X 光胶片至于包裹的膜上,压片,分别曝光不同的时间,如数秒到数分钟,定影显影冲洗. 【注】 :曝光时 间需根据曝光强度做相应的调整.若是背景过高,可使用两张 X 光胶片同时压片. 注意事项 1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作. 2)步骤 1~5 可在日光灯下操作;