PDF《www.microimage.com.cn》

www.

microimage.com.cn

2008 年7月31 日 第三期 Page

1 www.microimage.com.cn

2008 年7月31 日 第三期 Page

2 栏目索引 显微课堂 使用显微镜,除了普 通的明视场观察,还 有专用的观察方法, 多达八种.它们各自的原理、特点、应用领 域…… 更多…… 缅怀天才-阿贝 恩斯特・卡尔・阿贝,一位天才 的光学家,一位敢于创新的 社会改革者.为德国乃至世 界的光学发展做出不可磨灭 的贡献,用行动提出企业创新改革.人们深深 缅怀这位天才…… 更多…… 系统专题 显微切割技术 由于其细微、原位、同质、结合的优势,越来 越多的应用于分子生物 学、细胞遗传学、产前 诊断、肿瘤学及病理学.同时,Zeiss、Leica、 MMI、 Arcturus 四大厂家的激光捕获显微切割 技术首次如此详细的对比…… 更多…… 新产品介绍 Imaris-多维软件专家 模块化设计,生命科学领域 显微图像分析、多维图像处 理和分析的主导软件…… X-Cite exacte 革命性新荧光光源.照明更 稳定、更突出的重复性…… 更多…… 专业论坛 进口显微镜国产化.利?弊? 显微镜跟放大镜有什么区别啊? 激光扫描共聚焦显微镜的分辨率?…… 更多…… 系列讲座 双光子显微镜专题 是不是双光子更高级呢? 可以替代其他共聚焦吗? 它究竟能看多深的样品?……

2008 年4月以来,中国 显微图像网在中科院、北大、清华等地举办讲 座,受到广大用户的认同.第三季度,活动将 扩展到南开、河北等地,敬请期待…… 更多…… 系列讲座活动正 在进行…… 显微镜的八种 观察方法 人物杂记 www.microimage.com.cn

2008 年7月31 日 第三期 Page

3

一、显微课堂 显微镜的八种观察方法 使用显微镜进行观察,最常见的是明视野观察,此外还有多种专用的观察方法, 它们利用不同的光学原理在普通显微镜上发展出来,分别为暗视野观察、相差(相衬)观察、微分干涉相衬观察、塑料微分干涉相衬观察、霍夫曼观察、偏光观察、 荧光观察.本文对这八种观察方法的原理、特点和应用一一做了简要阐述.

一、明视野(Brightfield) 明视野是传统的显微观察方法,常应用于医疗和生物学领域,例如组织切片和 涂片等染色样品的观察.通常需要用 H&

E、 Gram 染色等方法染色.所有显微镜均 能完成此功能. 原理:即为显微镜成像的基本原理.显微镜的 放大是通过透镜来实现的,物镜和目镜各相当于一 个凸透镜.以下为透镜的两步放大过程: (1)当物 体位于透镜物方二倍焦距以内,焦点以外时,则在像方二倍焦距以外形成放大的倒 立实像;

(2)当物体位于透镜物方焦点以内时,则像方无像的形成,而在透镜物方 的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚像. 明视野成像的特点是视场明亮,图像较暗.

二、暗视野(Darkfield) 暗视野的特点和明视野不同,不直接观察到照明的光线,而是光束斜射,观察到 被检物体的反射或衍射光线.因此,视场为黑暗的背景,而被检物体则呈现明亮的 像,看起来就像夜晚的繁星. 原理:根据丁道尔现象,微尘细粒在强光直射通过的情况下,不能为人眼所见, 这是因为光线过强及绕射现象等因素,而看不到微尘的像.若光线斜射它们,则由 乳癌,A-Plan 20x 胚(孢)囊,A-Plan 40x www.microimage.com.cn

2008 年7月31 日 第三期 Page

4 于光的反射或衍射,微尘细粒似乎增大了体积,而为人眼可见.暗视野观察便是利 用这一原理设计出来. 暗视野显微镜的结构与明视野显微镜 基本相同,只是采用的是暗场聚光镜. 优点:暗视野观察的优越性,在于分辨率提高,能观察 到在明视野下观察不到的极其微小的物体外部细节. 在明视 野观察的油浸物镜下,最高分辨率可 达0.4μm;