PDF《童L 姚萱》

第l3卷第3 朝1998年 9月中国病毒学VIROL OG1 C A S

1 N1 CA V0 I

1 3 NO

3 S e p

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9 8 ~ 一,b/、,.

/ . ? 人类疱疹病毒 6型感染细胞免疫学特性 究童L~姚萱季晓辉 赵有宏 丁如予 周瑶玺 ' ' ― ― ― 一f南京医科大学 傲生物学救研皇, 南京

2 1 o

0 2

9 ) 摘要采用间接 免疫荧光 法、APAAP岱 及MT T法,研究了^类疱疹 病毒 6型( HHV- ~) 中国南 京 地方株 C N5感染细胞病毒抗原 表达的形 志学和动力学 特征 、 C D抗原表 逸陌性 细胞百 分率的变 化及PHA诱导 的细胞增殖 反应的 改变.结果显示 . C N5感染哜麻单十按细 虢( C l i Me s ) 后8~1

2 h 即 可在细胞 内检 出病 毒抗颞 , 至接种后 拈h,病毒抗 骧阳性细 胞可达

3 6 % ;

C N5感染 C B MC s 和戚^外周血单个核 细晦 ( P B MC s ) 后可 引起两 者CD3阳性 细瓶 减少、 c D 4阳性 细貔增 多, 丽对CD

2、cI)

8、CD45RA阳性细胞 百分率未见 明显影响 t C N 5感 染娜 胞裂解 涟对 P HA诱导 的PBMC ~ 增殖反应具有抑 制作 用, 遗种 抑制作用与该裂解液 的蛋 白浓 度之间 呈一剂 量依赖 关系. 且 可被 H HV -

6 抗 血清所逆 转. 关键词 人类 疱疹病毒6 型坚坚∑:),盛盟 纽盥r 皋塞邑蓝蛙 人类疱疹病毒 6型( HHV .

6 ) 自1986年首次分离… 以来, 已披证实 为婴幼 儿急疹( t ) 【 a n . t h e m s u b i t u m,E s ) 的主要病原 因子, 并因其嗜淋巴细胞特性受到广砭重视 .根据 其体外生长 特点 、 对单抗的反应性及限制性 内切酶酶 切图谱等方 面的特 征可分 为A、 B两型2j.我室姚 壁、 陈斌等

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9 4 年报告从南京 E S患儿 P B MC s 中分离出新的疱疹样病毒, 鉴定为 H H V -

6 B 型株【

3 】 .其中 3株在体外培养中稳定传代. 分别命名 为CN

5、CN8 、 C N1

0 .随后研究 了它对 T NF - 、 I F N. 、 I L 一 6及 I L . 8等 细胞 因子 的诱 生和 N K 活性 的影 响[

4 -

6 J .本研究以 地方 分离株CN5为代表, 研究HH V一 6感染人单个核细胞后病毒抗原表 达的形 态学和动 力学特征 、 C D抗 原表达阳性 细胞百分率的变化及 P HA诱导的细胞增殖反应的改变, 以便 为进一步研究 HHV. 6的致 病性和免疫性 提供 参考 . 材料与方法

1 材料1.1病毒株 H HV -

6 南京 地方株 C N

5 , 由我室 从ES患 儿急性 期外 周血单 个核 细胞 中分 离培养 获得 , 在人 C B MC s 上传代培养 .

1 2 细胞 ① C B MC s : 健康 产婴 脐带 血由南京市妇产 医院产房提供 . 肝索抗凝 , 淋 巴细胞分离渡 密度梯 度离 心分离 单个棱细 胞.细胞浓度为

2 *1 旷/ mE .培荐条件 :

2 0 %新 生牛血 清RPM1

1 6

4 0, 古PHA

5 u g / mL 、 I I ・

2 1

0 u / mI , 青、链霉素各

1 0

0 u / mL , 各氨酰胺 2mi n d/

1 3 7℃ 、

5 %C O2 进 行培 养.0 P B MC s : 取 自健康成人外 周血, 其分离 培养方法 同CBMC s .

1 3 主要 试剂 C D

2 、 C D

3 、 C I M、 C D

8 、 C D

4 5 RA单抗 , T细胞 亚群检 测试 剂盒, 羊抗 兔荧 光抗体均 为北 京邦 定公司产品 ;

MT T为Fluka产品 ;

P HA为Sigma产品;

S e p h a ms e

4 B 、 溴氰为瑞典 P h a r ma c i a 产品. 收祷日期 :1

9 9 8―0 2―0

9 , 修回日期 :1

9 9 8―0 5―0

4 国家厦省 教委 自然科学基盎资助课题 一 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 3期 赵 蓓等 : 人类疱 疹病 毒 6型感 染细胞免疫学特性研究