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产品说明书 人间充质干细胞成脂诱导试剂盒 货号:FY200007 仅用于科学研究 Version 1.

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邮箱:fuyuanbio@fuyuanbio.com 人间充质干细胞成脂诱导试剂盒 仅用于科学研究 产品信息 产品名称:人间充质干细胞成脂诱导试剂盒 货号:FY200007 批号:见包装 试剂清单: 序号 名称 数量 货号 A 人间充质干细胞成脂诱导基础培养基

90 ml *1 FY200007-A B 成脂诱导添加物 B

5 ml *1 FY200007-B C 成脂诱导添加物 C

5 ml *1 FY200007-C D 包被溶液

10 ml *1 FY200007-D E 油红 O 染色液(储液)

5 ml *1 FY200007-E 存储与有效期: 组分 A、D、E 于2-8 ℃避光保存,组分 B、C 于-20 ℃避光保存.所有组分 均须避免反复冻融及复温,各组分在所需要的温度下有效期为

1 年,配制完成的 完全培养基于 2-8 ℃保存,有效期

1 个月. 适用细胞: 人骨髓间充质干细胞、人脂肪间充质干细胞、人脐带间充质干细胞、人羊膜 间充质干细胞、人牙髓间充质干细胞、人脐带血间充质干细胞,其他组织来源的 人间充质干细胞. 产品介绍 间充质干细胞(MSC)具有多向分化的潜能,体外在一定条件下可以诱导分 化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞.2006 年国际细胞治疗协会(ISCT)确定 此三项检测指标是 MSC 鉴定的必检项目,目前以 MSC 为基础的研究报道均会对

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邮箱:fuyuanbio@fuyuanbio.com 该三个指标进行鉴定.在多种组织来源和制作方法的 MSC 药品质量控制中,成骨、成脂、成软骨也是必检指标. 为满足科研和制药对 MSC 分化能力的鉴定,弗元生物结合多年 MSC 研究经 验优化 MSC 诱导试剂盒, 在稳定性、 易用性上大幅改进, 采用了独创的小包装. 该试剂盒的设计用途, 首先, 用于鉴定人 MSC 是否具有成脂分化能力, 满足 MSC 质量控制的要求.其次,诱导培养基还可用于研究诱导分化过程中的其他检测, 如mRNA 检测、lncRNA 检测、microRNA 检测、蛋白表达检测、油脂定量检测、 免疫组化检测等. 本产品仅适用于科学研究. 操作方法 实验准备 试剂配制: 诱导液 B:2-8℃过夜融化添加物 B 液,B 液使用前须 37℃复温

30 分钟,充 分混匀.将基础培养基 A 液平均分成

2 份,各45 ml,加入添加物 B 液配制 成完全诱导培养基 B,充分混匀. 诱导液 C: 2-8℃过夜融化添加物 C 液, 加入基础培养基 A 液的另一份

45 ml, 配制成完全诱导培养基 C,充分混匀. 注意:添加物 B 液必须充分复温,内容物充分解冻为透明无沉淀.混合成诱导完全培养 基后必须充分混匀,2-8 ℃保存.整个过程须确保无菌操作,各试剂开封前以 75%酒精 擦拭表面. 油红 O 染液(工作液) :取油红 O 储液,与蒸馏水以 3:2 的比例混合均匀, 中性滤纸过滤,即配制成了油红 O 染液(工作液) . 培养皿处理: 加适量包被溶液 D 液到培养器皿中,轻轻摇动使其覆盖整个培养器皿底面,

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邮箱:fuyuanbio@fuyuanbio.com 室温静置 30-60 分钟.弃去溶液 ,室温晾干. 注意:建议使用六孔板,每孔加 D 液1ml,使用其他培养器皿时需考虑实验结果的稳定 性.整个过程需在超净工作台中操作,避免污染. 自备试剂: ? 消化液(0.25%Trypsin-0.04%EDTA 或其他 ) ? 磷酸盐缓冲液(DPBS) ? MSC 完全培养基 ? 4%中性多聚甲醛溶液 注意:若MSC 完全培养基不含血清,则需要准备胰酶抑制剂.MSC 消化极易过度,建议 稀释 0.25%胰酶消化液一倍,且严格控制消化时间. 操作步骤 1. 准备所需诱导分化的 MSC,当细胞融合达 85%左右时,用消化液消化细胞, 并用 MSC 完全培养基重悬. 2. 按照 4*104 cells/cm2 的密度将细胞接种于已包被处理的六孔板中,每孔 MSC 完全培养基