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网址:www.yeasen.com 第1页,共2页HB181122 Hieff? Long Taq DNA Polymerase 长片段DNA聚合酶 产品信息 产品名称 产品编号 规格 Hieff? Long Taq DNA Polymerase 长片段 DNA 聚合酶 10107ES62

125 U Hieff? Long Taq DNA Polymerase 长片段 DNA 聚合酶 10107ES78 5*

125 U 产品描述 Hieff? Long Taq DNA Polymerase 是Taq DNA Polymerase 与一种含有 3' →5'外切酶活性的蛋白组成的混合酶, 其保真性 是Taq DNA Polymerase 的6倍,专门用于长片段的扩增.独特的缓冲体系使 Hieff? Long Taq DNA Polymerase 可扩增长达

8 kb 的人基因组片段和

10 kb 左右的质粒模板.PCR 扩增产物的 3'端带 A,可直接用于 TA 克隆. 产品组分 编号 组分 产品编号/规格 10107ES62(125 U) 10107ES78(5*

125 U) 10107-A Hieff? Long Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

25 μL

25 μL*

5 10107-B 2*Hieff? Long Taq Buffer (含Mg2+ ,dNTPs)

1 mL*

4 1 mL*

20 活性定义 用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,74℃,

30 min 内,摄入

10 nmol 的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为

1 个 活性单位(U) . 质量控制 核酸外切酶残留检测:20 μL 反应体系,10 U 本品和

1 μg λDNA -HindIII,37℃下孵育

4 h,DNA 的电泳谱带无变化. 核酸内切酶残留检测:20 μL 反应体系,10 U 本品和

1 μg λDNA,37℃温育

4 h,DNA 的电泳谱带无变化. 大肠杆菌残留 DNA 检测:

50 μL 体系中,加入

2 U 本品,以无菌 ddH2O 为模板,扩增 E.coil 16s rDNA 基因.30 个循环后扩 增产物进行 1% 琼脂糖凝胶电泳,EB 染色,无扩增条带. 运输与保存方法 冰袋运输.-20? ℃保存,有效期

1 年. 注意事项 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作. 上海翊圣生物科技有限公司 客服热线:400-6111-883 E-mail: order@yeasen.com 本产品仅作科研用途! 第2页,共2页PCR 反应体系(推荐冰上配制) 组分 体积 终浓度 ddH2O to

50 μL - 2*Hieff? Long Taq Buffer (含Mg2+ ,dNTPs)

25 μL 1* DNA 模板 适量 Primer 正向 (10 μM) 2.5 μL 0.5 μM Primer 反向 (10 μM) 2.5 μL 0.5 μM Hieff? Long Taq DNA Polymerase (5 U/μL) 0.2 μL

1 U/50 μL 【注】 : 1)试剂使用:使用前要充分融化混匀. 2)聚合酶浓度:推荐使用

1 U/50 μL.可以在 0.5-2 U/50 μL 之间进行优化,请勿超过

2 U/50 μL. 3)Mg2+ 终浓度:体系终浓度为 1.5 mM.如有特殊需要,可用

50 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM 为间隔向上摸索. 4)不同模板的推荐使用量(50 μL 反应体系) 模板种类 用量 动植物基因组 DNA 100-500 ng 大肠杆菌基因组 DNA 10-100 ng λDNA、质粒 DNA 0.01-1 ng PCR 扩增程序 循环步骤 温度 时间 循环数 预变性 95℃

5 min

1 变性 95℃

30 sec 30-35 退火 55℃

30 sec 延伸 72℃

30 sec/kb 终延伸 72℃

7 min

1 【注】:退火温度需要根据引物退火温度调整,一般设置成低于引物退火温度 1-2℃即可.