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4 US EVERBRIGHT? INC.

技术支持: 0512-88965152 www.useverbright.com 产品说明书Super GelRed? 核酸凝胶染料 10,000* 产品货号:S2001 ( in water ) S2002 ( in DMSO ) 产品规格:0.5 mL 储存条件:避光,室温保存 产品介绍 Super GelRed ? 是一种高灵敏、无毒超安全和超稳定的 荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中) .它可替代溴化乙 锭(EtBr,EB) ,具有远高于 EB 的灵敏度,同时不需要脱 色.由于 Super GelRed ? 和EB 有相同的光谱特性,因此用 它替代 EB 时不需要更换成像系统. 使用方法 1.胶染法(用法同 EB) (1)制胶时加入 Super GelRed ? 核酸染料 (例如:每50 mL 琼脂糖溶液中加入

5 μL Super GelRed ? 10,000* 储液,以此比例类推) . (2)按照常规方法进行电泳. 注意事项: 此方法染色染料用量相对较少,500 μL 染料大约可以 做100 块50 mL 的胶. 由于 Super GelRed ? 具有良好的热稳定性, 可以在热的 琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却.摇晃,振 荡或者翻转以保证染料充分混匀.也可以选择将 Super GelRed ? 储液加到含有琼脂糖粉末的电泳缓冲液中,然后用 微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶.Super GelRed ? 兼容所有常用的电泳缓冲溶液. 2.泡染法 (1)按照常规方法进行电泳. (2)用H2O 将Super GelRed ? 10,000* 储液稀释约 3,300 倍到 0.1 M NaCl 中,制成 3* 染色液. (例如将

15 μL Super GelRed ? 10,000* 储液,

5 mL

1 M NaCl加到45 mL H2O 中) . (3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中, 缓慢加入足量的 3* 染色液浸没凝胶, 室温振荡染色

30 min 左右, 即可获得理想的效果. 最佳染色时间根据凝胶厚度以 及琼脂糖浓度不同而略有不同.对于含 3.5~10%丙烯酰胺 的凝胶,染色时间通常介于

30 min 到1h,并随丙烯酰胺含 量增加而延长. 强烈推荐: 为了缩短泡染时间, 染色液可以预先加热至 70℃ 左右,然后放入凝胶,孵育 10min 即可获得理想的效果.具 体步骤见下页使用说明. 注意事项: 用泡染法染色时,染料用量较多,单次使用的染色液 可重复使用

3 次左右.3*Super GelRed ? 染色液可以大量制 备,在室温下避光保存直至用完. 注:1. 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡 染法染色以确认问题是否与染料有关. 2. 如果染色后问题依旧存在, 则说明问题与染料无关, 请尝试:降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间 以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法染色. Super GelRed ? EB 图一. Super GelRed ? 、EB 胶染法电泳效果对比 (1% Agar 凝胶在 1*TBE 缓冲液中电泳,1kb DNA ladder 上样量分别为: 200ng, 100ng, 50ng, 25ng, 使用 302nm 激发的紫外凝胶成像仪拍照. )

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4 US EVERBRIGHT? INC. 技术支持: 0512-88965152 www.useverbright.com Super GelRed? 使用说明

一、实验目的 核酸的琼脂糖凝胶电泳实验, 对核酸 (DNA 或RNA) 进行分离、鉴定和纯化等分析.

二、主要试剂 1. 琼脂糖(如US Everbright A2015) 2. 1* TBE 电泳缓冲液 3. 0.1 M 的NaCl 水溶液 4. DNA Marker: 如US Everbright 1kb DNA ladder (DL2031) 5. 10000*Super GelRed ? in water/DMSO(S2001/2002)

三、实验方案 1. 根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉(如1%的凝 胶,即1g琼脂糖加入

100 mL 1*TBE) . 2. 加入一定量的 1*TBE 电泳缓冲液 (总液体量不宜超过锥 形瓶的 50%容量) 注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须一致. 3. 锥形瓶在微波炉中加热,溶化琼脂糖.此操作重复 2-3 次,直至琼脂糖完全溶化,形成均