PPT《水产动物营养与饲料科学实验指导》

2、公用仪器数量 量筒 5毫升 2个量筒 10或20毫升 各1个半微量凯氏蒸馏器 1套电炉 1000瓦 1个蒸气发生瓶 3000毫升、平底短颈 1个定时钟 1个毒气柜 1架

二、试剂 一个学生做2个测定所需药品数量粉末硫酸钾-硫酸铜混合物(3:1研磨混匀)0.5克硫酸(比重1.84,无氮) 24毫升硼酸溶液2%20毫升氢氧化钠溶液30%40毫升甲基红一甲烯蓝混合指示剂 1毫升(取200毫升0.1%甲基红乙醇溶液与50毫升1%甲烯蓝乙醇溶混匀.此混合指示剂在碱性溶液呈绿色,在酸性溶液紫红色)标准盐酸溶液(0.01摩尔/升.) 600毫升 【实验操作步骤】

1、凯氏定氮仪的构造和安装 凯氏定氮仪由蒸汽发生器、反应管及冷凝器三部分组成.蒸气发生器包括电炉及一个1.2升的烧瓶.蒸气发生器借橡皮管与反应管相连,反应管上端有一个玻璃杯,样品和碱液可由此加入到反应室,反应室中心有一长玻璃管,其上端通过反应室外层与蒸气发生器相连,下端靠近反应室的底部.反应室外层下端有一开口,上有一皮管夹,由此可放出冷凝水及反应废液.反应产生的氨可通过反应室上端细管及冷凝器通到吸收瓶中,反应管及冷凝管之间借磨口连接,防止漏气. 安装仪器时,先将冷凝管垂直地固定在铁架台上,冷凝管下端不要距离实验台太近,以免放不下吸收瓶.反应管固定在另一铁架,蒸气发生器放在电炉上,安装完毕不得轻易移动.

2、消化(1) 称取饲料样本0.5克两份,粪便样本0.5克两份,将称样纸卷成筒状,小心无损地将样本放入100毫升洗净烘干的凯氏烧瓶中.另取2个凯氏烧瓶作为对照,测定试剂中可能含有的微量物质.(2) 分别加入硫酸钾.硫酸铜混合物0.2克,浓硫酸5毫升.再加玻璃珠2粒,以防消化时液体溅失.(3) 在凯氏瓶上加一个小漏斗,将凯氏烧瓶放在消化架的电炉上加热.开始加热时,先用小火,以免瓶内产生大量泡沫,溢出瓶口.等泡沫停止产生后,再加强火力.消化时经常转动烧瓶,使全部样本浸入硫酸内.如有黑泡溅在瓶壁,应待烧瓶冷却后加少量蒸馏水冲洗之,再继续加热消化.如有黑炭粒不能全部消化,则待烧瓶冷却后,补加少量浓硫酸,继续加热,直至瓶内溶液澄清呈透明淡绿色为止,消化才告完毕. 一般饲料消化需3~4小时,消化过程中产生SO2,有刺鼻味,故需在毒气柜中进行.(4)烧瓶冷却后加蒸馏水10毫升,摇匀,然后将烧瓶中溶液无损地移入50毫升容量瓶内,用蒸馏水冲洗凯氏烧瓶数次,洗液亦注入容量瓶中,并以蒸馏水稀释至刻度,混匀备用.

3、蒸馏(1)蒸馏器的洗涤:蒸气发生器中盛有几滴硫酸酸化的蒸馏水,关闭皮管夹,将蒸馏发生器的水烧开,让蒸气通过整个仪器.15分钟后,在冷凝器下端放一个盛有5毫升2%硼酸溶液和1.2滴指示液的锥形瓶.冷凝管下端应完全浸没在液体中,继续蒸馏1.2分钟,锥形瓶内的溶液如不变色则证明蒸馏器内部已洗涤干净.移开锥形瓶通气1分钟,用水冲洗冷凝管口,然后用手涅紧橡皮管,由于反应外层蒸气冷缩,压力减低,反应室凝结的水可自动吸出进入,打开皮夹将废水排出.(2)取50毫升锥形瓶数个,各加入5毫升2%硼酸溶液和混合指示剂2滴,置于蒸馏装置的冷凝管下,使管口浸入硼酸溶液内. (3)煮沸蒸气发生瓶中蒸馏水.用移液管取10毫升消化液,细心地由凯氏蒸馏装置上的小玻杯注入反应室,将小玻杯棒状玻璃塞塞紧,使之不漏气.取10毫升30%的氢氧化钠溶液注入小玻杯,小心地轻轻提起棒状玻塞,使氢氧化钠溶液流入反应室,立刻将玻塞盖紧,加水于小玻杯,使少许水流入反应室以洗涤碱液,部分水留于小玻杯,以防漏气.夹紧外套管出口的橡皮管,开始蒸馏.蒸气吹入反应室,用定时钟定时,使氨气通过冷凝管流入锥形瓶的硼酸溶液中,此时锥形瓶中的溶液由紫色变成绿色,蒸馏3-5分钟,移动锥形瓶,使硼酸液面离开冷凝管,继续蒸馏1分钟,并用少许蒸溜水冲洗管口外壁.将锥形瓶移开蒸馏装置,准备滴定. (4)蒸馏完毕后,在小玻杯中加满蒸馏水,将玻棒提起流入反应室中,随手夹紧橡皮管以断气源,于是反应室中的残液自动吸入反应室外层,如此冲洗4次后将外套管下端出口的橡皮管打开,使反应室外层的残液排出.待残液排完后,夹紧橡皮管.(5)待样品和空白消化液蒸馏完毕后,同时进行滴定.